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FastBlue蛋白染色液
產品編號 |
規(guī)格 |
貯存 |
運輸 |
RTD6202-02 |
500ml |
常溫 |
常溫 |
● 儲存、效期及運輸:
常溫貯存;有效期兩年;常溫運輸。
注:如4℃貯存,會有結晶形成,37℃溫浴融化后可繼續(xù)使用。
● 產品簡介
FastBlue蛋白染色液是以考馬斯亮藍G-250為主要成分,采用新配方配置而成??捎糜赟DS-PAGE或非變性PAGE膠(native gel)的快速染色。
特點:方便快捷-不用漂洗,不用加熱,不用脫色,不用固定,條帶5分鐘可見。
靈敏度高-檢測下限10 ng蛋白
兼容性好-適用于變性和非變性膠以及質譜分析
綠色環(huán)保-不含甲醇,冰醋酸
● 用前必讀:
1 使用前如發(fā)現(xiàn)瓶中有少許沉淀,請混勻后使用。
2以下“使用方法”是針對0.75mm厚度,10×10cm凝膠染色程序。
● 使用方法:
1. 漂洗:將電泳后的PAGE膠取下放入塑料容器中,用適量蒸餾水漂洗一下。
2. 染色:棄蒸餾水,加入適量染色液(以剛剛覆蓋過膠面為適),搖床上常溫搖動,根據(jù)下表確定染色時間。
待檢測蛋白量 |
染色時間 |
>1 μg |
~5分鐘 |
100 ng-1 μg |
~10分鐘 |
10 ng-100 ng |
~60分鐘 |
3. 脫色:收集染色液于容器中,凝膠中加入適量蒸餾水漂洗凝膠,洗去浮色;蒸餾水中搖床常溫搖動脫色~10分鐘;重復脫色一次至凝膠幾乎無藍色背景。
4. 記錄:觀察記錄結果。
● 附:質譜處理程序
1. 切下待檢蛋白條帶置于1.5ml離心管中。
2. 加入1ml 30%乙醇或30%丙酮(也可用30%醋酸,但會導致蛋白N端酰基化)。
3. 處理30分鐘。
4. 重復步驟2,3直到去除所有染料。一般處理2-3次既能完全去除染料。
5. 質譜分析。
● 注意事項:
1. 使用方法中的各種參數(shù)僅針對面積8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm的凝膠,如果使用更大面積或更厚的凝膠,請加入更多的染色液并延長染色的時間。
2. 常規(guī)染色所需的漂洗,固定,脫色步驟都無必要。
3. 本染色液可以重復利用1-2次,敏感性會有輕微下降,請延長染色時間。
4. 本染色液有輕微腐蝕性,請帶手套操作。使用后,請蓋好瓶蓋,常溫密封保存。
● 問題解答:
Q1 FastBlue染膠的最佳溫度是多少? |
A1 為達到最佳的染色效果,推薦常溫(20-25℃)染色。 |
Q2 FastBlue溶液需要低溫貯存嗎? |
A2 Fastblue不需要低溫貯存,常溫貯存(20-25℃)即可。4-8℃貯存,FastBlue會有結晶生產,37℃溫浴融化后可繼續(xù)使用。 |
Q3 FastBlue的染色原理是什么? |
A3 FastBlue染色原理與經典考馬斯亮藍G250染色原理相同(與蛋白質中堿性氨基酸結合),優(yōu)點是更加快速和更高的靈敏度。 |
Q4 FastBlue染色后,凝膠可以用蒸餾水保存嗎? |
A4 可以,蒸餾水保存最為簡單,也可以保存在稀釋的冰醋酸中。 |
Q5 FastBlue染色后的凝膠能做質譜分析嗎? |
A5 可以。請參閱“質譜處理程序”。 |
Q6 FastBlue染色的凝膠能做Western Blot嗎? |
A6 不可以。蛋白的染色是不可逆的,染色的凝膠不能用作下游的轉膜操作。 |
Q7 Fastblue能重復使用嗎? |
A7 FastBlue可以重復使用2-3次,但靈敏度有所下降,可以通過延長染色時間來彌補。 |
Q8 為什么凝膠過夜染色后條帶出現(xiàn)涂抹狀拖尾? |
A8 FastBlue過夜染色不會對凝膠過度染色。出現(xiàn)抹涂狀拖尾原因是上樣量太大,因為FastBlue染色靈敏度較高。另外,分子量較小的蛋白在過夜染色中會有擴散現(xiàn)象,我們推薦染色最好在60分鐘內完成。 |
Q9 FastBlue有固定凝膠的作用嗎? |
A9 FastBlue是水系溶液,沒有固定凝膠的作用。然而,由于染色會在60分鐘內完成,染色前無需對凝膠進行固定。 |
中國農業(yè)科學院植物保護研究所提供照片
使用FastBlue蛋白染色液(貨號:RTD6202)發(fā)表部分文章列表:
1. [2016 IF=1.64] Effects of washing and
membrane removal pretreatments on the antioxidant properties of grass carp (Ctenopharyngodon idella) protein hydrolysates
produced by in vitro digestion.
Author: Xiaowei Zhang,Qixing Jiang,Yanshun Xu,Wenshui
Xia.
Product: RTD6202 FastBlue蛋白染色液
Journal: International Journal of Food Science and
Technology. 2017,52, 1260-1268.
Institution:State Key Laboratory of Food Science and
Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University
Paper link:https://ifst.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/ijfs.13393
2. [2017 IF=0.707] Prominent enhancement of
peptide-mediated targeting efficiency for human hepatocellular carcinomas with
composition-engineered protein corona on gold nanoparticles.
Author: Xiaowei Zhang, Fang Yang, Qixing
Jiang, Yanshun Xu & Wenshui Xia.
Product: RTD6202 FastBlue蛋白染色液
Journal: Journal of Aquatic Food Product Technology.
2018,Vol. 27, NO. 5, 580–591.
Institution:State Key Laboratory of Food Science and
Technology, School of Food Science and Technology, Jiangnan University
Paper link:https://doi.org/10.1080/10498850.2018.1461155
3. [2022 IF=5.518] Prominent enhancement of
peptide-mediated targeting efficiency for human hepatocellular carcinomas with
composition-engineered protein corona on gold nanoparticles.
Author: Mingpeng Liu, Wenjia Lai, Mengting
Chen, Pengyu Wang, Jingyi Liu, Xiaocui Fang, Yanlian Yang, Chen Wang.
Product: RTD6202 FastBlue蛋白染色液
Journal: Colloids and Surfaces A: Physicochemical
and Engineering Aspects. 662
(2023) 131016.
Institution:National Center for Nanoscience and
Technology,CAS
Paper link:https://doi.org/10.1016/j.colsurfa.2023.131016
4. [2023 IF=8.5] Synergistic effects of
matrix metalloproteinases on the degradation of
collagen
in abalone (Haliotis discus hannai).
Author: Yu-Lei Chen, Le-Le Su, Hua Liu,
Tian-Bo Zhang, Guiling Li, Le-Chang Sun, Duanquan Lin, Tengchuan Jin, Ling-Jing
Zhang, Min-Jie Cao
Product: RTD6202 FastBlue蛋白染色液
Journal: Food Chemistry 473 (2025) 143111
Institution:College of Ocean Food and Biological
Engineering, Jimei University
Paper link:https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2025.143111
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